ICS13.060 C51 中华人民共和国国家标准 GB/T18204.3—2013 代替GB/T18204.1—2000 部分代替GB/T17220—1998 公 公共场所卫生检验方法 第3部分:空气微生物 Examinationmethodsforpublicplaces— Part3:Airbornemicroorganism 2013-12-31发布 2014-12-01实施 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 中国国家标准化管理委员会发布目 次 前言 Ⅲ ………………………………………………………………………………………………………… 1 范围 1 ……………………………………………………………………………………………………… 2 术语和定义 1 ……………………………………………………………………………………………… 3 细菌总数 1 ………………………………………………………………………………………………… 4 真菌总数 3 ………………………………………………………………………………………………… 5 β-溶血性链球菌 4 ………………………………………………………………………………………… 6 嗜肺军团菌 5 ……………………………………………………………………………………………… 附录A(规范性附录) 现场采样检测布点要求 8 ………………………………………………………… ⅠGB/T18204.3—2013 前 言 GB/T18204《公共场所卫生检验方法》分为六个部分: ———第1部分:物理因素; ———第2部分:化学污染物; ———第3部分:空气微生物; ———第4部分:公共用品用具微生物; ———第5部分:集中空调通风系统; ———第6部分:卫生监测技术规范。 本部分为GB/T18204的第3部分。 本部分按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。 本部分代替GB/T18204.1—2000《公共场所空气微生物检验方法 细菌总数测定》,部分代替 GB/T17220—1998《公共场所卫生监测技术规范》中的空气微生物采样要求。 本标准与GB/T18204.1—2000和GB/T17220—1998相比,主要变化如下: ———增加了真菌总数检验方法; ———增加了β-溶血性链球菌检验方法; ———增加了嗜肺军团菌检验方法。 本部分由中华人民共和国卫生部提出并归口。 本部分由中华人民共和国卫生部负责解释。 本部分负责起草单位:中国疾病预防控制中心环境与健康相关产品安全所。 本部分参加起草单位:江苏省疾病预防控制中心、深圳市疾病预防控制中心、马鞍山市卫生局卫生 监督所。 本部分主要起草人:金银龙、刘凡、王俊起、陈晓东、余淑苑、潘力军、陈健、张宝莹、张琦、周连、 赵至荣。 本部分参加起草人:孙群露、林弈芝、张大伟、董坤、刘洋。 自本部分实施之日起,GB/T18204.1—2000全部内容和GB/T17220—1998中相应内容同时 废止。 GB/T18204.1—2000的历次版本发布情况为: ———GB/T18204.1—2000。 GB/T17220—1998的历次版本发布情况为: ———GB/T17220—1998。 ⅢGB/T18204.3—2013 公共场所卫生检验方法 第3部分:空气微生物 1 范围 GB/T18204的本部分规定了公共场所空气中细菌总数、真菌总数、β-溶血性链球菌和嗜肺军团菌 的现场采样与实验室培养方法。 本部分适用于公共场所空气中细菌总数、真菌总数、β-溶血性链球菌以及嗜肺军团菌的测定,其他 场所可参照执行。 注:本部分中同一个指标如果有2个或2个以上检验方法时,可根据技术条件选择使用。 2 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 2.1 细菌总数 totalbacterialcount 公共场所空气中采集的样品,计数在营养琼脂培养基上经35℃~37℃、48h培养所生长发育的嗜 中温性需氧和兼性厌氧菌落的总数。 2.2 真菌总数 totalfungicount 公共场所空气中采集的样品,计数在沙氏琼脂培养基上经28℃、5d培养所形成的菌落数。 2.3 β-溶血性链球菌 β-hemolyticstreptococcus 公共场所空气中采集的样品,经35℃~37℃、24h~48h培养,在血琼脂平板上形成的典型菌落。 2.4 嗜肺军团菌 legionellapneumophila 样品经培养在GVPC琼脂平板上生成典型菌落,并在BCYE琼脂平板上生长而在L-半光氨酸缺失 的BCYE琼脂平板不生长,进一步经生化实验和血清学实验鉴定确认的菌落。 2.5 撞击法 impactingmethod 采用撞击式空气微生物采样器,使空气通过狭缝或小孔产生高速气流,从而将悬浮在空气中的微生 物采集到营养琼脂平板上,经实验室培养后得到菌落数的测定方法。 2.6 自然沉降法 naturalsinkingmethod 将营养琼脂平板暴露在空气中,微生物根据重力作用自然沉降到平板上,经实验室培养后得到菌落 数的测定方法。 3 细菌总数 3.1 原理 采用撞击法或自然沉降法采样、营养琼脂培养基培养计数的方法测定公共场所空气中的细菌总数。 1GB/T18204.3—2013 3.2 撞击法 3.2.1 仪器和设备 3.2.1.1 六级筛孔撞击式微生物采样器。 3.2.1.2 高压蒸汽灭菌器。 3.2.1.3 恒温培养箱。 3.2.1.4 平皿:ϕ90mm。 3.2.2 培养基 3.2.2.1 营养琼脂培养基成分: 蛋白胨 10g 氯化钠5g 肉膏 5g 琼脂 20g 蒸馏水1000mL 3.2.2.2 制法:将蛋白胨、氯化钠、肉膏溶于蒸馏水中,校正pH为7.2~7.6,加入琼脂,121℃,20min灭 菌备用。 3.2.3 采样 3.2.3.1 采样点:见附录A。 3.2.3.2 采样环境条件:采样时关闭门窗15min~30min,记录室内人员数量、温湿度与天气状况等。 3.2.3.3 采样方法:以无菌操作,使用撞击式微生物采样器(3.2.1.1)以28.3L/min流量采集5min~ 15min。采样器使用按照说明书要求进行。 3.2.4 检验步骤 将采集细菌后的营养琼脂平皿置35℃~37℃培养48h,菌落计数。 3.2.5 结果报告 3.2.5.1 采样点细菌总数结果计算:菌落计数,记录结果并按稀释比与采气体积换算成CFU/m3(每立 方米空气中菌落形成单位)。 3.2.5.2 一个区域细菌总数测定结果:一个区域空气中细菌总数的测定结果按该区域全部采样点中细 菌总数测定值中的最大值给出。 3.3 自然沉降法 3.3.1 仪器和设备 3.3.1.1 高压蒸汽灭菌器。 3.3.1.2 恒温培养箱。 3.3.1.3 平皿:ϕ90mm。 3.3.1.4 采样支架。 3.3.2 培养基 见3.2.2。 2GB/T18204.3—2013