ICS59.060.10 CCSW10 中华人民共和国国家标准 GB/T32718—2024 代替GB/T32718—2016 棉花纤维中脱叶剂残留量的测定 Determinationofdefoliantresiduesincottonfibers 2024-03-15发布 2024-10-01实施 国家市场监督管理总局 国家标准化管理委员会发布前 言 本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则 第1部分:标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 本文件代替GB/T32718—2016《棉花 噻苯隆残留量测定方法》,与GB/T32718—2016相比,除 结构调整和编辑性改动外,主要技术变化如下: a) 更改了范围,补充了噻节因、敌草隆、脱叶磷、乙烯利、环丙酸酰胺5种落叶剂残留量的测定(见 第1章,2016年版的第1章); b) 增加了样品的取样要求(见7.1); c) 更改了样品的前处理方法(见7.2,2016年版的7.1、7.2、7.3); d) 删除了HPLC/DAD的分析方法(见2016年版的7.4); e) 增加了HPLC-MS/MS的分析方法(见7.3、7.4); f) 增加了脱叶剂物质的种类(见附录A); g) 增加了取样要求(见附录B)。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由全国纤维标准化技术委员会(SAC/TC513)提出并归口。 本文件起草单位:中国纤维质量监测中心、上海质量监督检验技术研究院、四川省纤维检验局、北京 亚分科技有限公司、苏州华浩纺织品有限公司、阿克苏地区检验检测中心纤维检验所、博州纤维检验所。 本文件主要起草人:周硕、赵海浪、王蕾、庞宁、王晓辉、郑佳辉、李伟、孙近、晏新程、姜进平、王杰、 李爱华、王会平、任猛。 本文件及其所代替文件的历次版本发布情况为: ———2016年首次发布为GB/T32718—2016; ———本次为第一次修订。 ⅠGB/T32718—2024 棉花纤维中脱叶剂残留量的测定 警示———使用本文件的人员应有化学实验室工作经验。本文件并未指出所有可能的安全问题。使 用者有责任采取适当的安全和健康措施,并保证符合国家有关法规规定的条件。 1 范围 本文件描述了采用高效液相色谱-串联质谱仪(HPLC-MS/MS)测定棉花纤维中噻苯隆、噻节因、敌 草隆、脱叶磷、乙烯利、环丙酸酰胺等脱叶剂残留量的试验方法。 本文件适用于棉花纤维中脱叶剂残留量的测定。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中,注日期的引用文 件,仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于 本文件。 GB/T6682 分析实验室用水规格和试验方法 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 脱叶剂 defoliant 采棉前喷洒使棉花叶片脱落的药剂。 注:包括噻苯隆、噻节因、敌草隆、脱叶磷、乙烯利、环丙酸酰胺等。 4 原理 采用乙腈和水的混合溶剂超声萃取试样中的脱叶剂,提取液经滤膜过滤后,使用HPLC-MS/MS进 行测定,外标法定量。 5 试剂 除非另有说明,在分析中所用试剂均为分析纯和GB/T6682规定的二级水。 5.1 乙腈,色谱纯。 5.2 乙腈-水混合溶液:体积比1∶1配制。 5.3 氨水:0.1%。 5.4 甲酸:0.1%。 5.5 脱叶剂标准溶液的制备。 5.5.1 单组分标准储备溶液: 6种脱叶剂的纯度≥95%,符合附录A的规定。 1GB/T32718—2024 用乙腈(5.1)配制有效浓度为500mg/L的噻苯隆、噻节因、敌草隆、环丙酸酰胺、脱叶磷的单组分 标准储备溶液,有效期为一年。 用乙腈-水混合溶液(5.2)配制有效浓度为200mg/L的乙烯利的单组分标准储备溶液,有效期为一 个月。 5.5.2 A组标准混合工作溶液: 从乙烯利、环丙酸酰胺、噻节因的单组分标准储备溶液中各移取500μL置于同一容量瓶中,用乙 腈-水混合溶液(5.2)定容至10mL,配得质量浓度为0.5mg/L的A组混合工作溶液。也可配制其他合 适浓度的混合标准工作溶液。A组标准混合工作溶液用于HPLC-MS/MS负离子扫描模式分析。 注:此溶液保存在棕色瓶中,置于0℃~4℃的冰箱中,现配现用。 5.5.3 B组标准混合工作溶液: 从噻苯隆、敌草隆、脱叶磷的单组分标准储备溶液中各移取500μL置于同一容量瓶中,用乙腈-水 混合溶液(5.2)定容至10mL,配得质量浓度为0.5mg/L的B组混合工作溶液。也可配制其他合适浓 度的混合标准工作溶液。B组混合工作溶液用于HPLC-MS/MS正离子扫描模式分析。 注:此溶液保存在棕色瓶中,置于0℃~4℃的冰箱中,现配现用。 6 设备和仪器 6.1 高效液相色谱-串联质谱仪(HPLC-MS/MS):配电喷雾离子源(ESI)。 6.2 超声波水浴发生器:工作频率(40±5)kHz,水浴温度可控制在(30±3)℃。 6.3 天平:分度值为0.01g。 6.4 玻璃容器:40mL~80mL,由硬质玻璃制成,配密封盖。 6.5 微孔有机相滤膜:孔径为0.22μm。 7 分析步骤 7.1 取样 将充分混合后的实验室样品平铺在工作台上,实验室样品按照附录B的取样要求进行多点取样。 7.2 试样萃取 取(0.50±0.1)g试样,精确至0.01g,置于玻璃容器(6.4)中,加入20mL乙腈-水混合溶液(5.2),盖 紧密封盖,振摇玻璃容器(6.4),使试样充分润湿。将试样置于(30±3)℃超声波水浴发生器(6.2)中超 声萃取(30±1)min,取出玻璃容器(6.4)冷却至室温,取部分萃取液经微孔有机相滤膜(6.5)过滤,滤液 作为测试液,待上机分析。 7.3 HPLC-MS/MS分析条件 由于测试结果取决于所使用的仪器,因此不可能给出色谱分析的普遍参数。采用下列参数已被证 明对测试是合适的。 a) 色谱柱:C18(2.1mm×100mm,3.5μm)或相当者; b) 流速:0.3mL/min; c) 柱温:30℃; d) 进样量:5μL; e) 负离子模式流动相:流动相A为0.1%氨水溶液(5.3),流动相B为乙腈(5.1); f) 正离子模式流动相:流动相A为0.1%甲酸溶液(5.4),流动相B为乙腈(5.1); 2GB/T32718—2024 g) 梯度洗脱条件按表1的要求; 表1 梯度洗脱条件 时间 min流动相A %流动相B % 0.0 95 5 2.0 95 5 5.0 5 95 8.0 5 95 8.1 95 5 10.0 95 5 h) 离子源:电喷雾离子源; i) 扫描方式:多反应监测(MRM); j) 干燥气:氮气; k) 雾化器压力:275.8kPa; l) 干燥气温度:340℃; m) 干燥气流速:8L/min; n) 扫描极性:乙烯利、环丙酸酰胺、噻节因采用负离子扫描模式,噻苯隆、敌草隆、脱叶磷采用正离 子模式扫描; o) 多反应监测分析条件按表2的要求。 表2 多反应监测分析条件 化合物母离子 m/z子离子 m/z传输电压 V碰撞能量 eV驻留时间 ms 乙烯利 143107a50 4 80 79 50 16 80 环丙酸酰胺 272160a80 20 80 228 80 8 80 噻节因 209161a66 4 80 91 66 8 80 噻苯隆 221102a94 12 80 51 94 24 80 敌草隆 23372a104 24 80 46 104 16 80 脱叶磷 31557a140 24 80 169 140 12 80 a定量离子。 3GB/T32718—2024 7.4 定性定量分析 分别取测试液(7.2)和混合标准工作溶液(5.5.2、5.5.3),参照HPLC-MS/MS分析条件进行分 析,比较测试液(7.2)和混合标准工作溶液(5.5.2、5.5.3)质量色谱峰的保留时间。如果测试液中目标分 析物色谱峰保留时间与标准物质的保留时间相对偏差在±2.5%范围内,且各定性离子的相对丰度与标 准物质一致,相对偏差不超过表3规定范围,则可判断检出目标分析物。 在7.3给出的HPLC-MS/MS分析条件下,每种脱叶剂的多反应监测选择离子流色谱图见附录C。 表3 定性验证时相对离子丰度的相对偏差允许范围 % 相对离子丰度 >50 >20~50 >10~20 ≤10 相对偏差允许范围 ±20 ±25 ±30 ±50 以混合标准工作溶液(5.5.2、5.5.3)目标分析物的响应峰面积为纵坐标,以目标分析物的浓度为横 坐标,绘制标准工作曲线,按照外标法进行定量计算。混合标准工作溶液(5.5.2、5.5.3)和测试液(7.2) 中目标分析物的响应值均应在仪器线性响应范围内,如果含量超过标准曲线范围,用乙腈-水混合溶液 稀释至合适浓度后测定。 7.5 空白试验 在不加试样的情况下,均按步骤7.2~7.4进行操作。 8 结果计算和表示 按照公式(1)计算试样中每种脱叶剂的含量。 Xi=(Ci-C0)×V×f m…………………………(1) 式中: Xi———试样中每种脱叶剂的含量,单位为毫克每千克(mg/kg); Ci———标准工作曲线上读取的测试液中每种脱叶剂的质量浓度,单位为毫克每升(mg/L); C0———标准工作曲线上读取的空白溶液中每种脱叶剂的质量浓度,单位为毫克每升(mg/L); V———测试液的萃取体积,单位为毫升(mL); f———稀释因子; m———试样的质量,单位为克(g)。 计算结果保留到