ICS65.150 B52 中华人民共和国国家标准 GB/T32781—2016 中 华 鲟 Chinesesturgeon 2016-06-14发布 2017-01-01实施 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 中国国家标准化管理委员会发布前 言 本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。 本标准由中华人民共和国农业部提出。 本标准由全国水产标准化技术委员会淡水养殖分技术委员会(SAC/TC156/SC1)归口。 本标准起草单位:中国水产科学研究院长江水产研究所。 本标准主要起草人:杨德国、朱永久、罗艳萍、邹世平、吴兴兵、陈建武、危起伟。 ⅠGB/T32781—2016 中 华 鲟 1 范围 本标准给出了中华鲟(Acipensersinensis Gray,1834)的主要形态构造特征、生长与繁殖、遗传学 特性及检验方法。 本标准适用于中华鲟的种质检测与鉴定。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。 GB/T18654.1 养殖鱼类种质检测 第1部分:检验规则 GB/T18654.2 养殖鱼类种质检测 第2部分:抽样方法 GB/T18654.3 养殖鱼类种质检测 第3部分:性状测定 GB/T18654.4 养殖鱼类种质检验 第4部分:年龄与生长的测定 GB/T18654.12 养殖鱼类种质检验 第12部分:染色体组型分析 GB/T18654.13 养殖鱼类种质检验 第13部分:同工酶电泳分析 3 名称与分类 3.1 学名 中华鲟(Acipensersinensis Gray,1834)。 3.2 分类位置 硬骨鱼纲(Osteichthyes),鲟形目(Acipenseriformes),鲟科(Acipenseridae),鲟亚科 (Acipenserinae),鲟属(Acipenser)。 4 主要形态构造特征 4.1 外部形态特征 4.1.1 外形 体呈长梭形,前端略粗,向后渐细,腹部较平。头部呈三角形,略为扁平,侧面呈楔形,体表有5列硬 骨板。幼体吻较尖,高龄个体吻较钝圆。头部腹面及侧面有许多梅花状陷器。 吻须2对,靠近口。胸鳍1对,扁平呈叶状,水平向后外侧伸展。腹鳍1对,较胸鳍小,向两侧平展。 背鳍1个,前基部与腹面的泄殖孔相对,斜向后伸。臀鳍位于尾部腹面,前基部位于泄殖孔之后,与背鳍 上下对应,较背鳍小而色浅。尾鳍歪形,上叶大,下叶小。各鳍呈灰色。 体色在侧骨板以上为青灰、灰褐或灰黄色;侧骨板以下逐步由浅灰过渡到灰黄色;腹部为乳白色。 中华鲟外形见图1。 1GB/T32781—2016 图1 中华鲟外形图 4.1.2 可量性状 可量性状见表1。 表1 中华鲟可量性状 性状指标幼鱼 体长11cm~38cm成鱼(雄鱼) 体长162cm~248cm成鱼(雌鱼) 体长235cm~297cm 变动范围 M±SDa变动范围 M±SDa变动范围 M±SDa 体长/体高 5.2~9.3 6.9±0.1 5.2~9.1 6.9±0.2 5.1~8.5 6.7±0.1 体长/头长 2.2~3.2 2.7±0.1 3.4~4.0 3.8±0.8 3.4~4.4 3.8±0.1 体长/尾柄长 10.1~19.815.1±0.310.2~30.017.8±1.710.3~28.020.0±1.1 体长/尾柄高 18.1~30.025.0±0.418.3~30.027.4±0.418.2~28.023.2±0.9 头长/吻长 1.8~2.0 1.9±0.1 2.2~3.6 2.4±0.1 2.0~3.7 2.5±0.1 头长/眼径 13.0~24.019.4±0.427.0~43.036.2±0.636.0~43.038.0±0.9 头长/眼间距 2.8~4.0 3.4±0.1 2.3~3.1 2.7±0.1 2.3~3.2 2.9±0.2 尾柄长/尾柄高 1.1~1.8 1.8±0.1 1.1~1.4 1.6±0.1 1.1~1.8 1.4±0.4 a“M±SD”指平均值±标准差。 4.1.3 可数性状 4.1.3.1 鳃耙数 左侧第一鳃弓外鳃耙数14~25。 4.1.3.2 背鳍鳍式和臀鳍鳍式 背鳍鳍式:D.50~68。 臀鳍鳍式:A.26~46。 4.1.3.3 骨板数 背骨板数:10块~16块。 侧骨板数:左右各1行,均为:26块~42块。 腹骨板数:左右各1行,均为:8块~16块。 2GB/T32781—2016 4.2 内部构造特征 4.2.1 消化系统 瓣肠发达,幽门盲囊半圆形,边缘约有17个指状突起。 4.2.2 鳔 色黑,一室,前端呈双角状,后端渐细。 5 年龄与生长 雌体比雄体生长快,不同年龄组体长和体重实测值见表2。 表2 中华鲟(人工养殖)体长和体重实测值 年龄 龄体长 cm体重 kg 0+11.0~49.3 0.01~1.05 1+47.4~73.5 0.75~4.50 2+58.3~104.8 1.55~8.15 3+71.5~121.8 13.50~23.00 4+119.0~140.9 10.00~32.20 5+126.4~158.9 18.60~35.50 6+115.1~136.9 16.50~26.10 7+138.8~147.2 24.20~48.80 8+164.2~176.8 49.90~63.70 9+148.9~170.3 35.40~49.00 10+154.3~178.5 50.20~65.00 注:体重与全长关系参见附录A。 6 繁殖 6.1 性成熟年龄 长江野生个体,雄鱼:8龄,雌鱼:13龄。 6.2 产卵类型 粘性卵,一次产卵。 6.3 繁殖周期 不小于2年。 3GB/T32781—2016 6.4 产卵时间 10月中旬至11月。 6.5 怀卵量 绝对怀卵量3.06×105粒~13.05×105粒;相对怀卵量1.72粒/g体重~4.45粒/g体重。 6.6 成熟卵的特征 黑色或灰黑色。 7 遗传学特性 7.1 细胞遗传学特性 染色体数:2n=264±;核型公式:78m+20sm+26st+140±mc,染色体组型见图2。 图2 中华鲟染色体组型 7.2 生化遗传学特性 眼晶状体苹果酸脱氢酶(MDH)同工酶电泳及扫描图见图2,酶带迁移率见表3。 4GB/T32781—2016 图3 中华鲟眼晶状体苹果酸脱氢酶(MDH)同工酶电泳图和扫描图 表3 中华鲟眼晶状体苹果酸脱氢酶(MDH)同工酶酶带迁移率 酶带 MDH1 MDH2 MDH3 迁移率 0.273 0.233 0.188 8 检测方法 8.1 抽样 按GB/T18654.2的规定执行。 8.2 性状测定 按GB/T18654.3的规定执行。 8.3 怀卵量测定 解剖称量卵巢全重。计算单位重量卵数:随机取卵巢组织10组,每组20g~25g,计算单位重量卵 数。绝对怀卵量为卵巢重量乘上单位重量平均卵数,相对怀卵量为绝对怀卵量除以体重。 8.4 年龄测定 取匙骨连胸鳍,清水煮沸15min~20min,取出于温水中刷去残留组织。匙骨洗刷干净后,擦干骨 片及时编号,晾干保存。刚处理过的匙骨可直接观察到宽带和窄带相间的年层,窄带称为年轮,存放过 一段时间的匙骨于清水中浸润数分钟再观察。匙骨径长结合匙骨基部黑暗带团的分布确定第一年带, 每一宽带和一窄带为一年带。 胸鳍年龄测定按GB/T18654.4的规定执行。 整个年龄测定以匙骨年轮和胸鳍切片年轮相互补充和纠正。 8.5 染色体组型分析 按GB/T18654.12的规定执行。 5GB/T32781—2016 8.6 同工酶电泳分析 8.6.1 样品的采集与制备 取中华鲟眼晶状体,加200μL的磷酸缓冲液(0.1mol/LpH7.2)在1mL匀浆器中冰浴匀浆,匀浆 液于4℃、1200r/min离心30min,取上清液,重复以上离心过程2次至上清液澄清。 8.6.2 制胶 将混匀的7.5%聚丙烯酰胺凝胶液倒入模板,插好梳子,置于36℃左右温度下30min,待凝胶聚合 后,置于冰箱中备用。 8.6.3 点样 吸取20μL样与2μL~3μL加样指示剂混匀,一起加到点样孔中。 8.6.4 电泳分离 采用垂直电泳,凝胶浓度7.5%。电极缓冲液为pH8.3的Tris-甘氨酸。稳压250V电泳3h。电 泳结束后,放入预先制备好并在37℃恒温箱中保温的同工酶染色液中染色。 同工酶电泳分析中使用的各种试剂见附录B。 8.6.5 结果分析 按GB/T18654.13的规定执行。 9 检验规则与结果判定 按GB/T18654.1的规定执行。 6GB/T32781—2016