书 书 书犐犆犛 １３ ． ３００ 犆犆犛犃 ８０ 中华人民共和国国家标准 犌犅 ／ 犜 ２１６０７ — ２０２２ 代替 犌犅 ／ 犜 ２１６０７ — ２００８ 化学品 　 一代繁殖毒性试验方法 犆犺犲犿犻犮犪犾狊 — 犜犲狊狋犿犲狋犺狅犱狅犳狅狀犲犵犲狀犲狉犪狋犻狅狀狉犲狆狉狅犱狌犮狋犻狅狀狋狅狓犻犮犻狋狔 　 ２０２２  ０７  １１ 发布 ２０２３  ０２  ０１ 实施 国家市场监督管理总局 国家标准化管理委员会 发布书 书 书前 　　 言 　　 本文件按照 ＧＢ ／ Ｔ１．１ — ２０２０ 《 标准化工作导则 　 第 １ 部分 ： 标准化文件的结构和起草规则 》 的规定起草 。 本文件代替 ＧＢ ／ Ｔ２１６０７ — ２００８ 《 化学品 　 一代繁殖毒性试验方法 》， 与 ＧＢ ／ Ｔ２１６０７ — ２００８ 相比 ， 除结构调整和编辑性改动外 ， 主要技术变化如下 ： ——— 更改了实验动物种属和品系的选择规定中的部分内容 （ 见 ４．１ ， ２００８ 年版的 ４．１ ）； ——— 更改了试验步骤中分组和对照规定中的部分内容 （ 见 ５．１ ， ２００８ 年版的 ５．１ ）； ——— 更改了染毒时间和程序 （ 见 ５．４ ， ２００８ 年版的 ５．４ ）。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利 。 本文件的发布机构不承担识别专利的责任 。 本文件由全国危险化学品管理标准化技术委员会 （ ＳＡＣ ／ ＴＣ２５１ ） 提出并归口 。 本文件起草单位 ： 天津海关工业产品安全技术中心 、 中检科健 （ 天津 ） 检验检测有限责任公司 、 天津工业大学 、 厦门凯越特科技有限公司 、 广东义胜检测有限公司 。 本文件主要起草人 ： 柳明 、 周丽丽 、 赵琢 、 杨磊 、 王华 、 翟自芹 、 李秀平 、 王晨光 、 左 癑 华 、 张颖 、 陈会明 、 向小云 。 本文件及其所代替文件的历次版本发布情况为 ： ——— ２００８ 年首次发布为 ＧＢ ／ Ｔ２１６０７ — ２００８ ； ——— 本次为第一次修订 。 Ⅰ 犌犅 ／ 犜 ２１６０７ — ２０２２ 化学品 　 一代繁殖毒性试验方法 １ 　 范围 本文件规定了化学品的一代繁殖毒性试验的实验动物 、 试验步骤 、 结果评价 、 试验报告 、 试验结果的解释 。 本文件适用于化学品的一代繁殖毒性的试验 。 ２ 　 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款 。 其中 ， 注日期的引用文 件 ， 仅该日期对应的版本适用于本文件 ； 不注日期的引用文件 ， 其最新版本 （ 包括所有的修改单 ） 适用于本文件 。 ＧＢ ／ Ｔ１４９２４．１ 　 实验动物 　 配合饲料通用质量标准 ＧＢ１４９２５ 　 实验动物 　 环境及设施 ３ 　 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件 。 ３ ． １ 繁殖毒性 　 狉犲狆狉狅犱狌犮狋犻狅狀狋狅狓犻犮犻狋狔 化学品引起的雌性或雄性实验动物生殖功能的损伤或生殖能力的降低 ， 或引起子代的非遗传性不 良效应 。 　　 注 １ ： 生殖能力降低 ， 如繁殖率的下降 。 　　 注 ２ ： 子代的非遗传性不良效应 ， 如生长发育毒性 ， 包括哺乳期的健康损害效应和致畸性 。 ４ 　 实验动物 ４ ． １ 　 实验动物的选择 选择健康初成年且至少经过 ５ｄ 适应期的实验动物 （ 首选大鼠或小鼠 ） 来进行繁殖毒性试验 。 雌性 动物应选择未产过仔的 。 试验开始时动物体重的差异不应超过平均体重的 ±２０％ 。 ４ ． ２ 　 实验动物的数量 雄性和雌性实验动物按 １∶１ 或 １∶２ 的比例合笼交配 。 交配的实验动物数应保证每个剂量组及空 白对照组都能获得 ２０ 只左右怀孕的实验动物 。 ４ ． ３ 　 饲养环境 实验动物的饲养和环境设施应符合 ＧＢ ／ Ｔ１４９２４．１ 和 ＧＢ１４９２５ 的要求 。 实验动物自由饮食 。 怀 孕的实验动物临近分娩时 ， 应单笼饲养 ， 需要时在分娩笼中放置造窝垫料 。 １ 犌犅 ／ 犜 ２１６０７ — ２０２２ ５ 　 试验步骤 ５ ． １ 　 分组和对照 染毒前将实验动物随机分为受试剂量组和空白对照组 。 如果受试样品使用赋形剂 ， 空白对照组应采用赋形剂的试验组最大使用量进行平行染毒 。 如果受试样品引起动物食物摄入量和利用率下降时 ， 那么空白对照组的实验动物应与受试剂量组实验动物配对喂饲 。 ５ ． ２ 　 剂量水平 试验至少设最高剂量 、 中间剂量 、 低剂量三个剂量组和一个空白对照组 。 最高剂量应使亲代实验动物 （ Ｆ０ 代 ） 出现明显的毒性反应 ， 但不引起实验动物死亡 ； 中间剂量可引起轻微的毒性反应 ； 低剂量应不引起实验动物及其子代的任何毒性反应 。 如果受试样品的毒性较低 ， 剂量达到 １０００ｍｇ ／ ｋｇ 时 ， 仍未对繁殖过程产生任何毒作用 ， 则可以采用限量试验 ， 即试验不设其他剂量组 。 若高剂量的预试验观察到明显的母体 （ Ｆ０ 代 ） 毒性作用 ， 但对生育无影响 ， 也可以采用预试验的高剂量进行限量试验 。 ５ ． ３ 　 染毒剂量 如果受试样品是通过灌胃或胶囊染毒时 ， 给样量应按每只实验动物的体重来确定 ， 且每周进行调整 。 对于妊娠期的母体 （ Ｆ０ 代 ）， 给样量应按每日体重计算 ， 或按妊娠的第 ０ 天或第 ５ 天的体重计算 。 ５ ． ４ 　 染毒时间和程序 实验动物染毒时间 ， 如采用大鼠 ， 雄性 Ｆ０ 代至少适应 ５ｄ 后开始给与受试样品 ， 染毒时间不少于 １０ 周 ， 如采用小鼠 ， 染毒时间约 ８ 周 （ 至少覆盖一个完整的精子生长周期 ）。 交配后处死雄性实验动物并进行检查 ， 或保留雄性实验动物至第二窝生产后试验结束前处死并进行大体解剖和指标检测 。 对于雌性大鼠 Ｆ０ 代 ， 至少适应 ５ｄ 后开始给与受试物 ， 给与时间从交配期两周前开始并覆盖交配期 （ ３ 周时间 ）、 妊娠期直到 Ｆ１ 代断乳的整个周期 。 ５ ． ５ 　 交配程序 ５ ． ５ ． １ 　 雄性和雌性实验动物按 １∶１ 或 １∶２ 的比例进行交配 。 ５ ． ５ ． ２ 　 雌性实验动物应始终与同剂量组的同一只雄性实验动物合笼直至受孕 ， 合笼最长时间可为 ３ 周 。 将检查到精子或阴栓的当天计为雌性实验动物妊娠的第 ０ 天 （ 判为交配成功实验动物 ）。 ５ ． ６ 　 窝的规格 出生后的第 ４ 天 ， 应将幼仔数尽量随机调整到每窝 ４ 雌和 ４ 雄 。 若得不到 ４ 雌和 ４ 雄 ， 可作不均等的调整 （ 如 ５ 雄 ３ 雌 ）， 但每窝的幼仔数至少为 ８ 只 。 ５ ． ７ 　 观察及检查 ５ ． ７ ． １ 　 临床观察 每日应至少观察实验动物一次 ， 记录有无行为改变 ， 难产或滞产以及所有的毒性反应 （ 包括死亡 ）。 ２ 犌犅 ／ 犜 ２１６０７ — ２０２２ ５ ． ７ ． ２ 　 体重和食物摄入量 ５ ． ７ ． ２ ． １ 　 在交配前和交配期 ， 应测定每只实验动物每天的食物摄入量 （ 交配期间雌 、 雄实验动物摄食量分别按交配前一周平均值计算 ）。 ５ ． ７ ． ２ ． ２ 　 产仔后 ， 每窝幼仔称量体重时 ， 母体 （ Ｆ０ 代 ） 的食物摄入量也应同时计算 。 ５ ． ７ ． ２ ． ３ 　 如受试样品是添加到水中进行染毒的 ， 还应记录水的摄入量 。 ５ ． ７ ． ２ ． ４ 　 亲代实验动物 （ Ｆ０ 代 ） 应在染毒的第 １ 天进行称重 ， 之后每周称量体重一次 。 ５ ． ７ ． ２ ． ５ 　 妊娠周期应从怀孕的第 ０ 天开始计算 。 生产下的幼仔应尽早分辨性别 ， 记录每窝的出生数 、 活仔数以及幼仔外观有无异常和畸形 ， 同时记录母体 （ Ｆ０ 代 ） 或幼仔在生理上和行为上的异常表现 。 ５ ． ７ ． ２ ． ６ 　 以每窝为单位 ， 对幼仔于出生的当天 、 第 ４ 天 、 第 ７ 天 、 第 １４ 天和第 ２１ 天进行称重 ， 并记录母体 （ Ｆ０ 代 ） 或幼仔在生理上和行为上的异常表现 。 ５ ． ７ ． ３ 　 大体解剖检查 死亡和到期处死的亲代实验动物 （ Ｆ０ 代 ） 都应解剖进行大体检查 ， 肉眼观察有无组织器官形态上的改变 ， 特别是生殖器官 。 死亡或濒临死亡的幼仔也应接受检查 ， 查看是否有外观或器官形态上的缺陷 。 ５ ． ７ ． ４ 　 病理组织学检查 保留解剖检查的所有亲代实验动物 （ Ｆ０ 代 ） 的卵巢 、 子宫 、 子宫颈 、 阴道 、 睾丸 、 附睾 、 精囊 、 前列腺 、 凝固腺 、 脑下垂体和靶器官标本 。 先对最高剂量组和空白对照组的动物标本以及剖检中发现异常的标本进行组织病理学检查 。 如最高剂量组没有发现有意义的病变 ， 其他剂量组的标本可不再进行病理检查 。 若最高剂量组发现有意义的病理改变 ， 则其他剂量组相关的标本也应做进一步的检查 。 ６ 　 结果评价 ６ ． １ 　 繁殖指数 通过参数计算公式 （ １ ） ～ 公式 （ ５ ） 评价繁殖指数 。 交配成功率 ＝ 交配成功实验动物数用于交配的雌性实验动物数 × １００％ …………………（ １ ） 受孕率 ＝ 受孕实验动物数用于交配的雌性实验动物数 × １００％ …………………（ ２ ） 活产率 ＝ 产生活仔的雌性实验动物数受孕实验动物数 × １００％ …………………（ ３ ） 出生存活率 ＝ 出生后 ４ｄ 幼仔存活数出生当时存活仔数 × １００％ …………………（ ４ ） 哺育存活率 ＝ ２