ICS13.300 CCSA80 中华人民共和国国家标准 GB/T21763—2025 代替GB/T21763—2008 化学品 啮齿类动物亚慢性经口毒性 试验方法 Chemicals—Testmethodofrepeateddoseoraltoxicitystudyinrodents 2025-10-05发布 2026-02-01实施 国家市场监督管理总局 国家标准化管理委员会发布前 言 本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则 第1部分:标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 本文件代替GB/T21763—2008《化学品 啮齿类动物亚慢性经口毒性试验方法》,与GB/T21763—2008 相比,除结构调整和编辑性改动外,主要技术变化如下: ———更改了“饲养条件”内容(见6.1.2,2008年版的4.1.2); ———更改了“临床观察”内容,增加了“血液学和临床生化检查”部分,增加了对内分泌敏感的终点要 求(见7.7,2008年版的4.6); ———更改了“病理学检查”内容,增加了“性器官病理学”部分(见7.8,2008年版的4.8); ———更改了“试验数据和报告”内容,主要修订“结果评价”及“试验报告”部分(见第8章,2008年版 的第5章)。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由全国危险化学品管理标准化技术委员会(SAC/TC251)提出并归口。 本文件起草单位:中国疾病预防控制中心职业卫生与中毒控制所、山西医科大学、福建宁佳竣检测 技术服务有限公司。 本文件主要起草人:陈宵、李斌、张红梅、张林媛、张意、肖经纬、鱼涛、牛勇、陈文婷。 本文件及其所代替文件的历次版本发布情况为: ———2008年首次发布为GB/T21763—2008; ———本次为第一次修订。 ⅠGB/T21763—2025 引 言 在评价化学品毒性特征过程中,通过急性毒性或者28d经口亚急性毒性试验获得初步毒性信息 后,进行亚慢性经口毒性试验。由于该试验染毒时间从28d延长到了90d,这一延长期可覆盖动物断 乳后的成熟和成长为成年期的阶段,因而可获得这一延长期可能出现的健康危害的信息。本文件提供 的信息包括主要的毒性效应、指出靶器官和蓄积的可能性,并可提供未观察到损害作用水平的估计值, 该数值可应用于慢性毒性试验的剂量选择水平的依据,以及建立人类暴露的安全基准。 本文件进一步强调了内分泌终点,并将其与现有的对神经、免疫和生殖影响的敏感性相结合。此 外,特别强调仔细观察动物的毒性表现,以获得尽量多的信息。本文件能够揭示受试化学品潜在的神经 毒性、免疫和生殖器官毒性效应,以便为进一步的深入研究提供依据。 ⅡGB/T21763—2025 化学品 啮齿类动物亚慢性经口毒性 试验方法 1 范围 本文件规定了化学品啮齿类动物亚慢性经口毒性试验方法的试验基本原则、试验方法、试验过程、 试验数据和报告。 本文件适用于化学品的亚慢性经口毒性试验。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中,注日期的引用文 件,仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于 本文件。 GB14925 实验动物 环境及设施 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 剂量 dose 受试物的量。 注:常以质量或动物单位体重所给予的受试物的量来表示。如将受试物掺入饲料进行喂养染毒时,也能用受试物 在饲料中的恒定质量分数来表示。 3.2 用量 dosage 由染毒剂量、染毒频率及持续时间组成的一般性术语。 3.3 未观察到损害作用水平 no-observed-adverse-effectlevel;NOAEL 未发现与染毒有关的有害作用的最高剂量。 3.4 明显毒性 evidenttoxicity 施用受试物后出现的明显毒性体征。 注:这些体征能够足以进行危害评估,随着染毒剂量的增加可导致严重的毒性体征和死亡。 3.5 雄激素活性 androgenicity 一种化学物质在哺乳动物体内像天然雄激素(例如睾酮)一样发挥作用的能力。 3.6 抗雄激素活性 antiandrogenicity 一种化学物质在哺乳动物体内抑制天然雄激素(例如睾酮)作用的能力。 1GB/T21763—2025 3.7 雌激素活性 oestrogenicity 一种化学物质在哺乳动物体内像天然雌激素(如雌二醇)一样发挥作用的能力。 3.8 抗雌激素活性 antioestrogenicity 一种化学物质在哺乳动物体内抑制天然雌性激素(例如雌二醇)作用的能力。 3.9 三碘甲状腺原氨酸 Tri-iodothyronine;T3 甲状腺激素的活性形式。 3.10 甲状腺素 Thyroxine;T4 甲状腺分泌的主要循环产物。 注:能在体内转化为T3。 3.11 促甲状腺激素 ThyroidStimulatingHormone;TSH 一种负责甲状腺激素的产生和释放的脑垂体激素。 3.12 甲状腺活性 thyroidactivity 一种化学物质在哺乳动物机体中像天然甲状腺激素(如T3)一样发挥作用的能力。 3.13 抗甲状腺活性 antithyroidactivity 一种化学物质在哺乳动物体内抑制天然甲状腺激素(如T3)作用的能力。 4 缩略语 下列缩略语适用于本文件。 HDL:高密度脂蛋白(Highdensitylipoprotein) LDL:低密度脂蛋白(Lowdensitylipoprotein) 5 试验基本原则 将受试物每日以不同剂量经口给予几个实验动物组,每组一个剂量。连续染毒90d,染毒期间密切 观察动物的毒性作用。对试验期间死亡的动物以及试验结束时存活后被处死的动物,进行大体解剖 检查。 6 试验方法 6.1 实验动物和饲养环境 6.1.1 动物的选择 首选大鼠,也可使用其他啮齿类动物物种(如小鼠)。一般应使用常用的品系和健康初成年的动物。 雌性动物应未受孕或产过仔的,鼠龄以断奶后为宜,不应超过9周龄。在试验开始时的动物体重差异不 应超过同性别平均体重的±20%。若是长期试验的前期预试验,这两项试验应使用同一品系,同一来源 2GB/T21763—2025 的动物。 6.1.2 饲养条件 6.1.2.1 饲养条件应符合GB14925要求。实验动物房的温度应为23℃±3℃,相对湿度应为30%~ 70%,以50%~60%为最佳。采用人工光照,应12h明,12h暗。饲以实验室的常规饲料,饮水不限, 喂饲时受试物与饲料充分混合。应注意避免饮食或动物垫料中可能含有不可接受的高浓度激素活性物 质,容易或可能干扰试验结果的解释(如植物雌激素)。已知实验室饮食中高水平的植物雌激素可增加 啮齿类动物的子宫重量,饮食中植物雌激素的含量不应超过350μg/g的水平。 6.1.2.2 动物应以相同性别的少量动物群养。如有科学依据,可单独饲养,但单独饲养的时间应限制在 必要的最短期限内。 6.2 动物准备 6.2.1 健康动物应未进行过其他试验,在染毒前应在实验室至少适应5d。应注明所用动物的物种、品 系、来源、性别、体重和年龄等信息。 6.2.2 应将动物随机分成染毒组和对照组。笼具的放置应减少因放置造成对试验的影响。对每只受 试动物进行唯一的标识,方法包括环标、标签、微型芯片和生物识别。 6.3 受试物准备 6.3.1 根据试验目的和受试物的理化特性,受试物可通过灌胃或将受试物加入饲料混合或饮水进行喂 养染毒。 6.3.2 需要时首先将受试物溶解或悬浮于适当的赋形剂中,应制备成水的溶液或悬浮液,其次可选谷 物油类(如玉米油)作溶剂,再次是其他溶剂。但是应了解非水赋形剂的毒性特点。应当测定制备物中 受试物的稳定性和均匀性。 7 试验过程 7.1 数量和性别 每个剂量组至少选用20只动物(雌雄各10只);如设计要定期处死动物,应增加动物数。根据受试 物或类似物已有的资料,如需要应在对照组和最高剂量组中各增加一个额外的附加组,每组至少包含 10只动物(每种性别各5只),用以观察染毒结束后的恢复期是否有迟发毒作用和毒性作用的可逆性, 恢复期时间的长短应根据所观察到的毒性来确定。 7.2 剂量设计 7.2.1 试验至少设三个染毒组和一个同步的对照组,但限量试验例外。可根据重复染毒试验和进行的 确定染毒剂量范围的预试验的结果,并结合受试物或结构相关化合物已有的毒理学和毒代动力学的研 究数据进行剂量设计。依据受试物的理化性质和生物作用设计最高染毒剂量,该剂量应使动物产生较 明显的毒性,但不应引起动物死亡和承受明显的痛苦。按照递减序列设计多个中间剂量组以观察剂量 反应关系,最低剂量组应为未观察到损害作用水平(NOAEL)。递减序列的组间隔一般为2倍~4倍, 相比采用较大的剂量间隔(例如,6倍~10倍间隔),增加第4个剂量组更可取。 7.2.2 对照组除了不用受试物染毒外,其他的处理应与染毒组动物相同。如使用了赋形剂应设赋形剂 对照组,且以各染毒组中赋形剂的最大使用剂量来进行试验。若混入饲料中的受试物使动物的进食量 减少,应设计饲料配对对照组,用于区分是毒性导致进食量降低还是受试物影响饲料的适口性导致进食 量降低。应注意所加的赋形剂或其他的添加物对受试物的吸收、分布、代谢和体内滞留时间影响,对受 3GB/T21763—2025 试物的化学性质影响而引起的毒性改变。也需考虑到对动物进食和饮水的消耗量和营养状态的影响。 7.3 限量试验 在本试验中,以1000mg/(kg·d)或大于1000mg/(k