ICS13.300 CCSA80 中华人民共和国国家标准 GB/T21771—2025 代替GB/T21771—2008 化学品 重复剂量毒性合并生殖/发育 毒性筛选试验方法 Chemicals—Testmethodofcombinedrepeateddosetoxicitystudywith thereproduction/developmentaltoxicityscreening 2025-10-05发布 2026-02-01实施 国家市场监督管理总局 国家标准化管理委员会发布前 言 本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则 第1部分:标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 本文件代替GB/T21771—2008《化学品 重复剂量毒性合并生殖/发育毒性筛选试验方法》,与 GB/T21771—2008相比,除结构调整和编辑性改动外,主要技术变化如下: ———更改了试验期限(见第4章,2008年版的第3章); ———更改了试验方法内容,增加了“发情周期”内容,筛选具有规律发情周期的雌性动物;增加了“窝 产仔数”内容,调整了窝仔数量及评定幼仔内分泌相关指标;增加了甲状腺激素水平的检测(见 第5章,2008年版的第4章); ———更改了数据统计方法内容(见第6章,2008年版的第5章); ———增加了“甲状腺激素水平”“成年雌性动物发情周期正常或异常的数量及周期时长”“幼仔体重 数据”“所有幼仔的AGD及AGD测量日的体重”“雄性幼仔的乳头评估情况”(见6.3)。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由全国危险化学品管理标准化技术委员会(SAC/TC251)提出并归口。 本文件起草单位:中国疾病预防控制中心职业卫生与中毒控制所、河北医科大学、福建宁佳竣检测 技术服务有限公司。 本文件主要起草人:张荣、庞雅贤、刘清萍、暴磊、李斌、陈宵、边洪英、于常艳、林立伟。 本文件及其所代替文件的历次版本发布情况为: ———2008年首次发布为GB/T21771—2008; ———本次为第一次修订。 ⅠGB/T21771—2025 引 言 在对化学品毒作用特征进行评价过程中,通常在急性经口毒性试验以后,进行重复剂量毒性的确 定。本文件在有限时间内提供重复剂量染毒后可能产生的健康损害效应。对于尚未批准进行90天研 究的化学品,本文件提供重复剂量染毒后的基本毒作用资料,可作为长期试验的预试验。 本文件包含了生殖/发育毒性筛选试验,初步提供受试物可能影响雄性和雌性生殖能力(如生殖腺 功能、交配行为、怀孕、胎鼠和幼仔的发育情况)的资料。本文件既适用于早期危险度评价,也适用于重 点关注的化学品。本文件不能提供关于生殖/发育各方面的完整信息,只能提供有限的手段来检测产前 暴露的产后表现,或产后暴露期间可能诱发的影响。由于(除其他原因外)剂量组的动物数量相对较少、 终点的选择以及研究时间较短等原因,本文件不能作为判定无生殖/发育毒性的确证依据。此外,若缺 乏其他生殖/发育毒性测试数据,阳性结果可用于初步的危险度评价,并有助于决定是否需要其他测试 及测试的时间安排。 本文件提供关于内分泌相关终点不良影响的数据,但不足以作为测试化学品是内分泌干扰物的充 分证据。此外,本文件还可提供一些神经毒性的信息。 在缺乏生殖/发育毒性、内分泌毒性和神经毒性研究资料时,阳性结果可用于初步的危险度评价,有 助于决定是否需要其他测试及测试的时间安排,用于评估现有化学品的毒性(尤其是当相关毒理学信息 极少或缺失时),并可作为替代方案,避免分别开展重复剂量毒性试验和生殖/发育毒性试验两项独立试 验。此外,本文件还适用于探索更全面生殖/发育毒性试验的剂量范围,或在其他相关场景下应用。 通常认为,怀孕动物与非怀孕动物对受试物的敏感度存在差异。与单独开展重复剂量毒性试验和 生殖/发育毒性试验相比,组合试验中剂量水平的确定更为复杂,需兼顾一般毒性评估与生殖/发育毒性 评价的需求。此外,由于试验中可能未同步评估血清学指标和组织病理学指标,对一般毒性相关结果的 解释难度可能高于独立的重复剂量毒性试验。鉴于上述技术复杂性,执行此类试验需要具备丰富的毒 性测试经验。另一方面,除所需动物数量较少外,组合试验在区分生殖/发育的直接毒性效应与间接毒 性效应方面可能更具优势。 本文件较常规28天重复剂量试验染毒时间长。但与同时开展常规28天重复剂量试验和生殖/发 育毒性试验相比,其优势在于动物使用量更少。 本文件采用经口染毒途径。如果采用其他暴露途径,需进行修改。 ⅡGB/T21771—2025 化学品 重复剂量毒性合并生殖/发育 毒性筛选试验方法 1 范围 本文件规定了化学品重复剂量毒性合并生殖/生长发育毒性筛选试验的试验基本原则、试验方法、 试验数据和报告。 本文件适用于检测化学品的重复剂量毒性及致畸性、繁殖及生长发育毒性筛选,也适用于致畸试 验、一代和两代繁殖毒性的预试验。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中,注日期的引用文 件,仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于 本文件。 GB14925 实验动物 环境及设施 3 术语、定义和缩略语 3.1 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1.1 雄激素活性 androgenicity 一种化学物质在哺乳动物体内表现出类似天然雄激素(如睾酮)生理作用的能力。 3.1.2 雌激素活性 oestrogenicity 一种化学物质在哺乳动物体内表现出类似天然雌激素(如雌二醇17β)的能力。 3.1.3 抗雌激素活性 antioestrogenicity 一种化学物质在哺乳动物体内抑制天然雌激素(如雌二醇17β)作用的能力。 3.1.4 甲状腺活性 thyroidactivity 一种化学物质在哺乳动物体内表现出类似天然甲状腺激素(如三碘甲腺原氨酸,T3)的能力。 3.1.5 抗甲状腺活性 antithyroidactivity 一种化学物质抑制哺乳动物体内天然甲状腺激素(如T3)作用的能力,影响新陈代谢及依赖甲状腺 激素的其他生理过程。 3.1.6 发育毒性 developmentaltoxicity 子代在出生前、围产期和出生以后所表现出的结构(机体缺陷)或功能异常。 1GB/T21771—2025 3.1.7 剂量 dose 受试物用量。 3.1.8 用量 dosage 包括染毒剂量、染毒次数及染毒期限在内的一般性术语。 3.1.9 生殖毒性 reproductiontoxicity 对后代的有害影响或对雄性和雌性生殖功能或能力的损害。 3.2 缩略语 下列缩略语适用于本文件。 AGD:从肛门到生殖器之间的距离(anogenitaldistance) PND:通常在生物医学和发育生物学中用于描述出生后的天数(postnatalday) UVBCs:组分未知或者可变的物质、复杂反应产物或者生物材料(chemicalsubstancesofunknown orvariablecomposition,complexreactionproductsandbiologicalmaterials) 4 试验基本原则 4.1 按照雌、雄两个性别,设多个剂量组给予受试物。直至处死,雄性动物的染毒期至少4周,即交配 前期最少染毒2周,交配期和交配后期染毒约2周。由于雄性动物交配前染毒时间相对较短,繁殖力不 能作为睾丸毒性的特异性敏感指标,因此对睾丸进行详细的组织学检查很重要。通过对染毒期内雄性 动物的交配行为/繁殖能力的观察,以及随后对雄性动物生殖腺的详细组织病理学检查可检出对雄性动 物繁殖力和精子形成的主要毒性作用。 4.2 雌性动物在整个试验期都进行染毒。包括交配前两周(至少包括两个完整的发情期),交配期、妊 娠期和分娩后至少13天,直至处死的前一天都需进行染毒。 4.3 在适应期结束后,试验持续时间取决于雌性动物的毒性表现。试验期限约为63天,即交配前至少 14天,交配期14天左右,妊娠期和哺乳期则分别22天和13天左右。 4.4 染毒期间,每日观察动物的毒性表现。对试验期间死亡或处死的动物都进行解剖检查。试验结束 时,所有存活动物均处死并进行解剖检查。 5 试验方法 5.1 动物选择 本文件的受试动物为大鼠。如选用其他种属动物,应作适当修改。避免选用繁殖力低和公认生长 发育缺陷率高的品系。首选健康、刚进入性成熟期、未经交配,并且未参加过任何试验的动物。所选动 物应注明种类、品系、性别、体重和周龄。试验开始时,动物的体重相差不应超过同性别平均体重的 20%。如果本试验是某项长期试验或完整的生殖试验的预试验,应确保两个试验所选试验动物的品系 和来源的一致性。 5.2 饲养条件 5.2.1 饲养条件应符合GB14925要求。动物实验室的环境温度需为23℃±3℃,相对湿度至少为 2GB/T21771—2025 30%,不宜超过70%,目标为50%~60%,但清扫动物实验室时除外。采用人工照明,保持12h光照和 12h黑暗交替循环。喂饲常规饲料,动物自由饮水。如采用喂饲染毒方式,为保证与受试物均匀混 合,可能会影响饲料的选择。 5.2.2 试验动物按性别、少量分笼群养(每笼不能超过5只),交配过程在合适的笼具中进行。孕鼠单 笼饲养,并给予造窝垫料。哺乳期雌鼠与其幼仔分别单独放置在笼中。 5.2.3 包括非掺饲料在内的饲料需定期进行污染物分析,周期由实验室自行拟定。饮食样本保留至报 告完成。 5.3 动物准备 健康成年动